
&凯新试剂介绍
PerCP-Cy5.5是一种复合荧光染料,由天然荧光色素PerCP(Peridinin-Chlorophyll-Protein,从藻类提取)与近红外荧光染料Cy5.5通过化学偶联形成的串联染料。它广泛应用于流式细胞术、免疫分析、蛋白质印迹及活细胞成像等领域,尤其在多色流式细胞术中作为高灵敏度标记工具,可实现多参数检测。其激发波长为488 nm(适配主流氩离子激光器),发射波长695 nm(近红外区域),兼容流式细胞仪如Calibur、LSR等,常用于标记抗体(如抗CD4、CD5等)以检测细胞表面或内部抗原。
结构特点
核心结构:PerCP提供高消光系数和量子效率,Cy5.5贡献长波长发射,通过荧光共振能量转移(FRET)机制增强信号。PerCP-Cy5.5为串联染料,兼具PerCP的稳定性和Cy5.5的近红外特性。
物理性质:固体粉末,溶于水,需避光保存(2-8℃短期,-20℃长期分装),避免反复冻融。
光谱特性:488 nm激发,发射峰677-695 nm,斯托克斯位移大,减少与其他染料(如APC、PE-Cy7)的光谱重叠,适合多色实验设计。
化学稳定性:抗光漂白,在固定剂中稳定,染色细胞可过夜保存。
常见问题及解决方法
荧光补偿问题:在多色实验中,PerCP-Cy5.5可能与APC等染料存在光谱重叠。解决方法包括调整流式细胞仪补偿设置,或选择互补染料(如PE-Vio615)以减少干扰。
光稳定性:长时间光照导致信号衰减。需使用抗荧光淬灭剂(如ProLong Gold),控制光照时间,或采用低光照操作。
储存与操作:避免反复冻融,操作时佩戴手套,通风橱处理。储存需避光、干燥,添加0.1%叠氮化钠抑制微生物生长。
仪器兼容性:不同流式细胞仪通道配置不同,需根据仪器规格选择荧光素组合(如Calibur的FL3通道检测PerCP-Cy5.5,而Aria可能需第4通道),避免通道冲突。
优势分析
高灵敏度与亮度:通过FRET机制,荧光强度显著高于单一PerCP,适合检测低至中表达抗原(如细胞因子受体、激活标志物)。
长波长发射:近红外区域减少背景干扰,提高信噪比,适用于复杂样本(如肿瘤微环境、深层组织成像)。
多色兼容性:与多种荧光染料(如FITC、PE、APC)组合使用,支持8色以上复杂流式面板设计,满足多参数检测需求。
稳定性与生物相容性:化学稳定性好,抗光漂白,水溶性佳,低毒性,适合体内成像及长时间实验。
应用广泛性:在免疫分型(如CD4⁺T细胞检测)、肿瘤研究(肿瘤浸润淋巴细胞分析)、疫苗评估(免疫应答监测)、药物筛选(免疫调节药物效果验证)等领域有广泛应用,如Elabscience的PerCP-Cy5.5标记抗CD4抗体在Nature、Science等高影响因子文献中被引用。
试剂名称:PerCP-Cy5.5串联染料;PerCP-Cy5.5
外观:固体
溶剂:水
激发波长(nm):489
发射波长(nm):679
运输:低温运输
包装:瓶装
纯度:≥95%
规格:1g、5g、10g
溶解性:溶于部分有机溶剂以及水
生产:西安凯新生物科技有限公司
硫辛酸聚乙二醇丙烯酰胺
硫辛酸聚乙二醇胆固醇
DBCO-Acid
DBCO-NHS Ester
DBCO-Maleimide
DBCO-C6-Acid
DSPE-PEG-SS-NH2
MPEG-SS-Hydroxyl
DSPE-PEG-Glucose
RB-PEG-Ph-aldehyde
AC-PEG-Ph-aldehyde
DSPE-PEG-TK-COOH
DSPE-PEG-SS-Amine
CHO-Ph-PEG-NH-Boc
注意:本试剂用于科研领域,其他用途概不适用!
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